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口蹄疫病毒VP1蛋白可溶性表达标签筛选
作者: 舒静超 李赛赛 申欢欢 郭豫杰
关键词: 口蹄疫病毒 VP1蛋白 可溶性 融合标签
摘要:为了提高口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达,根据A型口蹄疫病毒核酸序列设计并合成了口蹄疫病毒VP1片段,将其克隆到pET21b(+)载体上,设计1对通用引物扩增10个融合标签Gri-fin、GST、NusA、SUMO、Thioredoxin、ProteinG、γ-crystallin、ArsC、PpiB、MBP,并分别将扩增的融合标签与VP1连接构建重组质粒,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5 mmol/L IPTG诱导其表达.SDS-PAGE结果表明,MBP、Grifin和GST能够促进口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达,其中MBP与VP1融合表达蛋白可溶部分占60%;Western blot鉴定分析结果显示,小鼠抗His标签单克隆抗体能识别表达的重组蛋白.表明成功表达了具有免疫学活性的融合蛋白MBP-VP1.