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茶树中奎尼酸/莽草酸-羟肉桂酰基转移酶基因的克隆及功能研究
作者: 魏丽
关键词: 茶树 绿原酸 奎尼酸 莽草酸-羟肉桂酰基转移酶
摘要:从茶树中分离到1个绿原酸生物合成相关基因,命名为CsHCT.该基因编码1个430个氨基酸的多肽,推测分子质量约为48.6 ku.蛋白质序列比对表明,CsHCT含有酰基转移酶的保守域HXXXD和DFGWG,与其他物种HCT的同源性在58%~82%.系统发育分析表明,CsHCT与咖啡中的HCT同源性最高,连同其他植物HCT形成一个独立的组群.通过大肠杆菌异源表达,纯化获得了CsHCT蛋白,并进行了催化活性研究.结果表明,重组的CsHCT能有效催化奎尼酸和莽草酸与香豆酰辅酶A的转酰基反应,分别生成香豆酰奎尼酸和香豆酰莽草酸.CsHCT不能催化奎尼酸和咖啡酰辅酶A生成绿原酸.
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