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烟草青枯菌Tn5突变体库的构建及突变位点分析
作者: 李小杰 李淑君 李成军 陈玉国 王海涛 邱睿 胡亚静
关键词: 烟草青枯菌 Tn5插入突变 无致病力菌株 TAIL-PCR 突变位点
摘要:为了从烟草青枯菌全基因组范围内发掘致病性相关基因,采用电转化法构建了一个Ez-Tn5转座子介导的烟草青枯菌TXLLJ14-3菌株插入突变体库,该突变体库包含1.2万个突变子,经烟草上的致病性检测,共得到216个无致病力或弱致病力突变菌株.利用TAIL-PCR扩增获得其中15个无致病力烟草青枯菌的Tn5侧翼序列,并对其插入位点进行了分析,结果表明,15个突变菌株的插入位点分别位于核苷酸水解酶、糖基转移酶、转座酶和合成酶等具有不同功能的基因上,这些基因受到干扰或破坏后,可能会抑制致病相关物质的表达或分泌,或者诱导烟草对病原菌产生抗性,从而表现出无致病力特征.
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