虎杖转录因子PcMYB1基因的克隆及原核表达

作者: 柳忠玉 [1] 雷健 [1] 李晓筱 [1] 刘婵 [1] 覃建兵 [1] 许锋 [2]

关键词: 虎杖 MYB转录因子 PcMYB1 原核表达苯丙烷代谢 RACE

摘要：为了探明髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYB)转录因子在虎杖苯丙烷代谢途径的作用,以虎杖叶片为材料,通过RT-PCR和RACE技术从虎杖中获得MYB转录因子基因,命名为Pc-MYB1,GenBank登录号为KY495789.序列分析表明,PcMYB1基因的cDNA序列全长1 152 bp,该基因开放阅读框为813 bp,编码270个氨基酸,推测蛋白质分子质量为30.455 ku.PcMYB1编码的氨基酸序列具有MYB类转录因子的共同特征,其N端具有R2、R3两个MYB结构域,同时其C端还存在一个抑制结构域C2基序pdLNL[D/E] LXI[G/S].系统进化树分析表明,该基因编码的蛋白质与矮牵牛PhMYB4的亲缘关系最近.将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中,构建融合表达质粒pET28a-PcMYB1,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达.SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白与预期大小一致.成功克隆PcMYB1基因的全长序列,构建的原核表达载体pET28a-PcMYB1可用于该基因的功能研究.

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虎杖转录因子PcMYB1基因的克隆及原核表达

作者: 柳忠玉 [1] 雷健 [1] 李晓筱 [1] 刘婵 [1] 覃建兵 [1] 许锋 [2]

关键词: 虎杖 MYB转录因子 PcMYB1 原核表达 苯丙烷代谢 RACE

关键词: 虎杖 MYB转录因子 PcMYB1 原核表达苯丙烷代谢 RACE