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大肠杆菌热稳定肠毒素Ⅰ和卵清蛋白融合蛋白的表达及免疫原性分析
作者: 王录军 [1] 段强德 [1] 冯丽丽 [2]
关键词: 产肠毒素性大肠杆菌 STa毒素 融合蛋白 免疫原性 疫苗
摘要:为探究大肠杆菌热稳定肠毒素Ⅰ (Heat-stable toxin type Ⅰ,STa)和鸡卵清蛋白(Chicken ovalbumin)串联表达的3×STa-ovalbumin重组融合蛋白的免疫原性,原核表达融合蛋白后,经SDS-PAGE和Western blot方法鉴定,将表达的融合蛋白纯化后免疫小鼠,利用ELISA方法测定免疫小鼠血清中抗STa抗体的滴度,应用体外中和试验检测抗体对STa毒素的中和作用.SDS-PAGE检测结果显示,融合蛋白分子质量约42 ku;Western blot分析结果显示,融合蛋白可被STa阳性血清特异性识别.小鼠免疫试验结果表明,融合蛋白具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗STa抗体滴度达到2.33,并且产生的抗体能在体外中和STa的毒性作用.以上结果表明,3×STa-ovalbumin融合蛋白具有良好的免疫原性.