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降解黄曲霉毒素B1菌株的筛选及毒素降解酶的分离
作者: 左瑞雨 [1] 尹清强 [2] 常娟 [2] 刘洪兵 [3] 王二柱 [4] 朱群 [4]
关键词: 黄曲霉毒素B1 筛选 降解酶 凝胶层析 鉴定 米曲霉
摘要:为了筛选具有降解黄曲霉毒素B1(AFB1)作用的菌株,并分离纯化高效AFB1降解酶,以AFB1作为降解AFB1菌株生长的能源和碳源进行初筛,将初筛得到的菌株接种于含有AFB1的培养基中,选择降解率最高的菌株进行固体发酵培养后提取粗酶液,通过硫酸铵分级沉淀和葡聚糖凝胶对降解AFB1的活性物质进行分离,SDS-PAGE蛋白质电泳检测降解酶蛋白质分子质量大小,并通过酶联免疫法测定不同分子质量的酶蛋白对AFB1的降解率,26 S rDNA和同源序列分析对降解率最高的菌株进行菌种鉴定.结果显示,降解AFB1能力最高的菌株为Y8,降解率为77.05%,凝胶层析分离出的31.7 ku的酶蛋白对AFB1的降解率达54.33%;菌种鉴定结果表明,真菌Y8为米曲霉.综上,筛选的米曲霉Y8能够高效降解AFB1,可有效缓解黄曲霉毒素对畜禽的危害,具有提高养殖效益的潜在应用价值.
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