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谷氨酰胺对高温应激奶牛乳腺上皮细胞凋亡及Bcl-2、HSP70表达的影响
作者: 张响英 [1] 唐现文 [2]
关键词: 奶牛乳腺上皮细胞 谷氨酰胺 热应激 HSP70基因 Bcl-2基因 Caspase-3活性
摘要:为探讨谷氨酰胺预处理抗高温应激损伤的作用,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,分为对照组、谷氨酰胺组、高温组、谷氨酰胺+高温组,采用MTT法检测细胞存活率、Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡、荧光定量PCR检测Bcl-2基因和HSP70基因的表达水平、比色法分析Caspase-3活性.结果显示,奶牛乳腺上皮细胞经谷氨酰胺预处理后,HSP70 mRNA表达量极显著增加(P<0.01),提高了热应激状态下细胞的热耐受性和存活力;与高温组相比,谷氨酰胺+高温处理组Bcl-2 mRNA表达量在热恢复0、6、12 h分别提高3.23倍(P<0.05)、2.49倍(P<0.05)、1.89倍(P>0.05),Caspase-3活性分别下降68.04% (P<0.01)、40.89% (P <0.05)、52.06% (P <0.01).综上,谷氨酰胺预处理促进了奶牛乳腺上皮细胞Bcl-2和HSP70表达,缓解了高温应激引起的Caspase-3活性上升,抑制了热应激所致的奶牛乳腺上皮细胞凋亡.
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