- · 我院召开“十四五”科技创新规划座谈会[01/07]
- · 我院召开“十四五”规划推进会[01/02]
- · 河南日报报业集团副总编辑孙德中一行来我院调研[01/01]
- · 广东省农业科学院院长陆华忠一行到我院考察调研[12/31]
- · 国家重点研发计划“猪重要疫病的诊断与检测新技术研究”项目推进会在郑州召开[12/30]
- · 我院召开种子工作座谈会[12/25]
- · 中共河南省农业科学院直属单位第三次代表大会胜利召开[12/24]
- · 省农业农村厅厅长申延平一行到我院调研[12/23]
塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备
作者:连凯琪 周玲玲 张明亮 张慢 王英杰 林正丹 宋玉伟
关键词: 塞尼卡谷病毒; 3ABC蛋白; 原核表达; 蛋白质纯化; 多克隆抗体;
摘要:为了开发塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)的检测试剂盒,克隆3ABC基因进行原核表达和纯化,并将纯化的3ABC蛋白免疫大鼠,制备抗3ABC蛋白的多克隆抗体。通过Western blot鉴定制备的多克隆抗体与表达的3ABC蛋白的特异性识别能力,通过ELISA测定多克隆抗体的效价。结果显示,3ABC基因在大肠杆菌中大量表达,且主要以包涵体形式表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,经纯化后得到单一条带。免疫大鼠制备的多克隆抗体效价大于1∶64 000,且与表达的3ABC重组蛋白发生特异性反应。综上,在大肠杆菌中成功表达了SVV 3ABC蛋白,且表达的重组蛋白具有免疫原性。