- · 我院召开“十四五”科技创新规划座谈会[01/07]
- · 我院召开“十四五”规划推进会[01/02]
- · 河南日报报业集团副总编辑孙德中一行来我院调研[01/01]
- · 广东省农业科学院院长陆华忠一行到我院考察调研[12/31]
- · 国家重点研发计划“猪重要疫病的诊断与检测新技术研究”项目推进会在郑州召开[12/30]
- · 我院召开种子工作座谈会[12/25]
- · 中共河南省农业科学院直属单位第三次代表大会胜利召开[12/24]
- · 省农业农村厅厅长申延平一行到我院调研[12/23]
基于局域表面等离子体共振(LSPR)的核酸适配体筛选新方法的建立
作者:郝俊芳 张英涛 邢广旭 王方雨
关键词: 适配体 LSPR-SELEX 链霉亲和素 毛细管电泳 KD值
摘要:为了快速、高效地筛选到靶标核酸适配体,急需通过指数富集的配基系统进化技术(SELEX)建立一种简便、高效和可视化筛选适配体的新方法.以链霉亲和素(SA)作为靶标模型,利用局域表面等离子体共振(LSPR)和毛细管电泳(CE)相结合的方法进行筛选和验证.结果显示,在第1轮LSPR-SELEX中,筛选到SA结合的适配体(SBA),并且通过LSPR的Trace Drawer数据分析软件计算出SBA的KD值为107μmol/L;在第2轮LSPR-SELEX中,SBA的KD值为98 nmol/L.结果表明,采用LSPR-SELEX技术经2轮筛选,使SBA的亲和力提高了1000倍.随后,将筛选到的SBA进行CE验证,结果显示,SBA适配体与其靶标SA具有良好的亲和性和特异性.综上,鉴于LSPR从初始DNA文库中分离和收集靶标适配体的高效性,LSPR-SELEX技术可用于核酸适配体的筛选.