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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒非结构蛋白nsp1α的表达及活性检测

作者: 司朝朝 [1,2] ; 史西保 [2,3] ; 李恭贺 [1,2] ; 乔松林 [2] ; 王丽 [2] ; 李青梅 [2] ; 王超 [2,4] ; 陈静 [2,5] ; 王寅彪 [2,5] ; 张改平 [2,6]

关键词: 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 非结构蛋白1α 重组蛋白 免疫学活性

摘要:为获得具有活性的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白1α(nsp1α),以BJ-4PRRSV nsp1α真核表达质粒pc DNA3.1-nsp1α为模板扩增nsp1α,克隆到原核表达载体p ET-28a,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导含有重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)。SDS–PAGE结果显示,nsp1α以包涵体形式高效表达,重组蛋白大小约为20 ku;Western blot结果显示,表达的重组蛋白能与小鼠抗His标签单克隆抗体反应;包涵体蛋白复性后,ELISA方法检测结果显示,重组蛋白能与1∶6 400稀释的PRRSV阳性血清反应。表明成功表达了nsp1α蛋白,且表达的重组蛋白具有较好的免疫学活性。


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