棉花黄萎病菌T—DNA插入突变体库的构建及致病缺陷突变体筛选

作者: 谷素静 ; 汪敏 ; 桑茜 ; 赵静 ; 李洪连

关键词: 棉花黄萎病大丽轮枝茵农杆菌介导的遗传转化 T—DNA插入突变致病性

摘要：大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）侵染引起的棉花黄萎病是棉花生产上的重要病害之一，而其致病的分子机制尚不清楚，为此，以强致病力落叶型黄萎病菌FGH2为材料，利用农杆菌介导转化技术构建棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库并进行致病缺陷突变体的筛选。当农杆菌与黄萎病菌分生孢子浓度比为250∶1、承载介质为NC膜、乙酰丁香酮浓度400μm o l/L、共培养时间48 h时，转化效率高达每106个分生孢子产生612．5个转化子。通过采用优化后的转化体系，构建了含1200个T-DNA插入转化子的棉花黄萎病菌突变体库。利用苗期分生孢子蘸根法测定300个转化子在棉花幼苗上的致病力，获得3个致病力显著降低的突变体181、546、1009，其中546的微菌核形成能力丧失，1009的微菌核形成能力明显下降。黄萎病菌T-DNA插入突变体库的构建，为棉花黄萎病菌致病及微菌核形成机制的研究奠定了基础。

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棉花黄萎病菌T—DNA插入突变体库的构建及致病缺陷突变体筛选

作者: 谷素静 ; 汪敏 ; 桑茜 ; 赵静 ; 李洪连

关键词: 棉花黄萎病 大丽轮枝茵 农杆菌介导的遗传转化 T—DNA插入突变 致病性

关键词: 棉花黄萎病大丽轮枝茵农杆菌介导的遗传转化 T—DNA插入突变致病性