拟除虫菊酯类农药降解酯酶EstA融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化

作者: 刘娜 [1,2] ; 徐汉卿 [2] ; 崔健 [1] ; 茆灿泉 [1] ; 许雷 [2]

关键词: 拟除虫菊酯类农药生物降解酯酶 estA基因可溶性蛋白原核表达条件优化

摘要：以前期克隆得到的拟除虫菊酯类农药降解基因estA（GenBank：DQ906143）为出发基因，构建表达系统，获得可溶性融合蛋白，并通过优化诱导表达条件，获得具有实际应用价值的相关应用参数。结果表明，成功构建了重组表达载体pMaI-c2X-estA并转化至宿主菌BL21（DE3），获得酯酶estA基因诱导表达系统；通过SDS—PAGE凝胶电泳、以α-乙酸萘酯为底物的酶活性检测及Westernblot方法，确认外源蛋白EstA在大肠杆菌宿主菌中成功表达并具有酯酶活性。重组基因工程菌可溶性原核表达诱导条件的优化试验表明，其最佳诱导表达条件是：Ca2＋浓度1．0mmol／L、诱导初始OD600值0．7、诱导剂IPTG浓度0．1mmol／L、诱导初始PH值7、诱导温度26℃、诱导时间17．5h，优化后的酯酶活性（92．03U／mg）较优化前（44．64U／mg）提高了1倍多。

上一篇：湖北省江陵县马铃薯黄萎矮化病病原鉴定
下一篇：南四湖流域农田肥料和农药流失率研究

拟除虫菊酯类农药降解酯酶EstA融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化

作者: 刘娜 [1,2] ; 徐汉卿 [2] ; 崔健 [1] ; 茆灿泉 [1] ; 许雷 [2]

关键词: 拟除虫菊酯类农药 生物降解 酯酶 estA基因 可溶性蛋白 原核表达条件优化

关键词: 拟除虫菊酯类农药生物降解酯酶 estA基因可溶性蛋白原核表达条件优化