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适于SDSPAGE分析的高粱叶片蛋白质提取方法
作者: 许克静 ; 陈云 ; 雷珍珍 ; 程海丽 ; 陈磊 ; 乐超银
关键词: 高粱 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质提取 样品制备
摘要：为了探索适于高粱叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析的样品制备方法,对TCA/丙酮沉淀后的蛋白质分别用裂解液Ⅰ（尿素＋硫脲＋CHAPS＋DTT）和裂解液Ⅱ（尿素＋DTT）2种裂解液进行裂解,用改良的Bradford法进行定量分析,并进行SDS-PAGE分离检测。结果表明,裂解液Ⅰ所得蛋白质质量浓度（2.538g/L）高于裂解液Ⅱ所得蛋白质质量浓度（1.905g/L）,且两者呈极显著差异（P〈0.05）,但裂解液Ⅰ所得蛋白质电泳条带出现1条杂带;而裂解液Ⅱ所得蛋白质能满足上样要求且电泳条带清晰无杂带。因此,TCA/丙酮沉淀并用裂解液Ⅱ进行裂解的方法适用于高粱叶片的SDS-PAGE分析。