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OsLEA5 c在大肠杆菌中的表达、纯化及对蛋白质的保护效应研究
作者: 胡廷章 陈再刚 秦娟 黄小云
关键词: 胚胎发育后期丰富蛋白 OsLEA5 c蛋白 乳酸脱氢酶 蛋白质活性
摘要:为了研究OsLEA5 c蛋白对其他蛋白的保护效应,在大肠杆菌DL21中异源表达OsLEA5 c蛋白,采用HiTrapTM chelating HP层析柱纯化OsLEA5c蛋白。纯化的OsLEA5c蛋白用于高温、脱水和冻融胁迫下对乳酸脱氢酶的保护效应研究。结果表明,在 PBS 缓冲体系中,50℃处理10、20、30 min后,乳酸脱氢酶的活性分别残留43.20%、24.53%、17.55%;而按1∶1的质量比加入纯化的OsLEA5 c蛋白后,乳酸脱氢酶活性分别保留85.77%、74.24%、65.27%。干燥脱水5 h后,乳酸脱氢酶活性仅保留2.55%~4.19%;按2∶1、5∶1和10∶1的质量比加入OsLEA5 c蛋白,乳酸脱氢酶活性分别保留17.59%、24.73%、36.39%。反复冻融5次,乳酸脱氢酶活性残留9.41%~12.14%;而按2∶1、5∶1和10∶1的质量比加入纯化的OsLEA5 c 蛋白,乳酸脱氢酶活性分别保留28.09%、69.44%、95.16%。表明OsLEA5 c蛋白对其他蛋白质具有保护作用,能减少高温、脱水和冻融胁迫对蛋白质的损伤。
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