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抗虫转CpTI基因植物定性PCR检测技术的建立
作者: 朱珠 ; 王永 ; 兰青阔 ; 赵新 ; 余景会 ; 郭永泽 ; 程奕
关键词: 豇豆胰蛋白酶抑制剂 基因特异性检测 定性PCR
摘要:为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。