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鸭新城疫病毒M基因的原核表达与多抗制备
作者: 王安平 朱善元 吴双 王永娟 左伟勇 洪伟鸣
关键词: 鸭新城疫病毒 M基因 原核表达 多抗
摘要:为制备鸭源新城疫病毒M蛋白的多克隆抗体,根据鸭新城疫病毒M基因序列设计1对特异性引物,RT -PCR 方法扩增出 M 基因,克隆入原核表达载体 pET -30a,转化大肠杆菌 BL21 (DE3),在IPTG的诱导下成功表达重组蛋白,SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白分子质量约为39 ku. 将目的蛋白切胶免疫ICR小鼠,制备重组蛋白的多抗血清,Western blot分析显示,制备的多抗血清能与鸭新城疫病毒感染的SPF鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应. 以上结果表明,M基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的鼠多抗血清可以用于M蛋白的检测.
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