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猪伪狂犬病毒gB和gC蛋白B细胞表位编码序列的融合表达及活性测定
作者: 张冲 [1] 刘芳 [2] 赵东 [3] 邓瑞广 [3] 张改平 [4] 李学伍 [3]
关键词: 猪伪狂犬病毒 gB蛋白 gC蛋白 B细胞表位 融合表达
摘要:依据猪伪狂犬病毒gB和gC蛋白的B细胞表位编码序列,分别设计gB和gC蛋白B细胞表位编码序列的融合扩增引物,利用融合PCR技术,将gB和gC蛋白B细胞表位编码序列有机地融合为gB-C表位编码序列. 将融合基因片段插入到原核表达载体pET28a,并转化大肠杆菌BL21 (DE3),1. 0 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白. SDS-PAGE结果显示,融合蛋白gB-C能够高效表达,重组蛋白的分子质量约为38 ku;经Western blot鉴定分析,小鼠抗His标签单克隆抗体和PRV阳性血清均能识别表达的重组蛋白. 表明成功表达了融合蛋白gB-C,且表达的重组蛋白具有较好的免疫学活性.
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